PCR基因擴增儀“位置的邊緣效應”實驗過程

　　

　　PCR基因擴增儀主要是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內InVitro的大量合成，用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制。PCR儀的原理為利用升溫使DNA變性，用限制性內切酶使DNA雙鏈解鏈，在聚合酶的作用下使單鏈復制成雙鏈，進而達到基因復制的目的。

　　

　　PCR原理為雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶的作用下，以單鏈為模版，根據堿基互補配對原則復制成新的單鏈，與模版配對成為雙鏈分子挎貝。在體外實驗中發現，DNA在高溫時也可以發生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計與模板DNA的5’端結合的兩條引物，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制，多次重復“變性解鏈—退火—合成延伸”的循環就可以以幾何級數大量擴增特定的基因。這就是PCR實驗過程.

　　

　　想得到一個的PCR實驗結果,zui關鍵所使用的PCR基因擴增儀,溫度均性是否穩定均勻.PCR溫度均勻是指樣品孔間的溫度差異，它關系到在不同樣品孔進行反應結果的一致。我們在實驗中發現有時用同樣的樣品，同樣的PCR反應程序，zui后的結果竟然差異非常明顯，或許就是因為不同位置的溫度不均一性所致。所以一些實驗人在做實驗中就固定用著那幾個孔，就是因為過往反復的教訓和認真的思索得出的結果.這個被我們稱為“位置的邊緣效應”,即原因就是PCR儀的溫度均勻性不好，特別是zui外周的樣品孔，溫度不均勻就會影響實驗結果。